Les interférons sont des protéines qui constituent une partie importante de nos systèmes de défense naturels. Ces protéines présentent également une activité antivirale remarquable. L’interféron α2b humain recombinant (rhIFNα2b) a été approuvé par la Food and Drug Administration des États-Unis en 1986. Depuis lors, il est utilisé comme agent antiviral pour le traitement de l’hépatite B et de l’hépatite C. problématique : la détection de rhIFNα2b est fastidieuse et chronophage.
Dans ce contexte, des chercheurs chinois, dans une nouvelle étude, ont récemment développé une nouvelle méthode pour la détection rapide et efficace de rhIFNα2b. Ce document a été mis en ligne le 8 juillet 2021 et a été publié dans le Journal d’analyse pharmaceutique le 30 avril 2022.
Pour développer leur nouvelle méthode, ils ont immobilisé un nouveau nanocorps sur une bande de papier. Le nanocorps utilisé dans cette méthode était à l’origine dérivé d’un alpaga, une espèce de mammifère camélidé d’Amérique du Sud. Par la suite, il a été généré dans le laboratoire de recherche à l’aide de la technologie de l’ADN recombinant, une technique utilisée pour sous-cloner des fragments d’ADN afin d’obtenir de grandes quantités de protéines synthétiques. Ceci est généralement réalisé à l’aide de bactéries ou d’autres cellules procaryotes. Un nanocorps est un fragment fonctionnel d’un anticorps plus grand. Comme le nouveau nanocorps immobilisé se lie étroitement et avec une grande spécificité au rhIFNα2b, il a été utilisé pour une détection rapide et infaillible du rhIFNα2b.
Selon le Dr Junzhi Wang, « En raison des avantages des nanocorps en termes de conservation, de production et de coût des réactifs, le test d’immunochromatographie à flux latéral utilisant des nanocorps a un fort potentiel pour remplacer les tests traditionnels de liaison au ligand à base d’anticorps pour un test d’identification rapide de protéines recombinantes thérapeutiques. »
L’équipe de recherche a caractérisé la liaison pour l’interaction I22-rhIFNα2b, c’est-à-dire la liaison entre le nanocorps 122 et le rhIFNα2b, à l’aide d’une plateforme Octet. Les données obtenues indiquaient clairement une liaison étroite. La spécificité de liaison a ensuite été validée à l’aide du Western blot, une technique utilisée pour détecter les protéines à l’aide d’anticorps spécifiques aux protéines.
« Les produits rhIFNα2b actuellement disponibles en Chine comprennent des injections, des poudres injectables, des gels et des pâtes. Les bandelettes d’immunochromatographie ne peuvent être utilisées que pour évaluer des liquides ou des produits sous forme de poudre qui peuvent être dissous et appliqués sur les bandelettes. En effet, le produit a besoin diffuser le long de la bandelette par capillarité ; les gels et les pâtes ne satisfont pas à cette exigence », explique le Dr Wang.
Fait intéressant, le test de détection de rhIFNa2b développé a une limite de détection de 1 µg/mL, ce qui est inférieur aux limites existantes. Cela en fait une technique de laboratoire plus sensible pour l’identification rapide de rhIFNα2b. Un autre grand avantage est l’utilisation de nanocorps pour la détection des protéines. En effet, les nanocorps peuvent être obtenus de manière économique en récoltant des cellules bactériennes peu coûteuses. De plus, de grands volumes de nanocorps peuvent être obtenus avec une relative facilité en utilisant des techniques de laboratoire couramment utilisées.
Le Dr Wang déclare : « Le temps de fonctionnement de l’identification de rhIFNα2b a été raccourci de deux jours à quelques minutes avec notre test. Il peut donc répondre aux besoins de détection rapide de cette famille de produits protéiques recombinants sur le marché et fournir un bon base pour améliorer l’efficacité de la détection des contrefaçons sur le marché. À l’avenir, une détection rapide pourrait être effectuée de manière globale.
En résumé, la méthode nouvellement développée pourrait ouvrir la voie à une détection plus fluide, plus rapide et précise des protéines recombinantes ou générées artificiellement, permettant un diagnostic et un traitement précoces de l’hépatite.
Xi Qin et al, Développement d’un nouveau test de bandelette immunochromatographique à flux latéral basé sur des nanocorps pour la détection rapide de l’interféron humain recombinant α2b, Journal d’analyse pharmaceutique (2021). DOI : 10.1016/j.jpha.2021.07.003
Fourni par Cactus Communications